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本制品是一种采用了最新单一溶液TMB显色技术，通过辣根过氧化物酶(HRP)催化TMB显色，用于免疫组化、原位杂交或膜显色等的显色液。本制品主要适用于免疫组化或原位杂交时HRP的显色检测，以及Western、Southern、Northern等HRP的膜显色检测，也可以用于原位检测细胞或组织内源性的过氧化物酶。

通常的TMB显色试剂由多个组份组成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不太方便，并且也容易导致结果不太稳定。本TMB显色液采用了最新的TMB显色技术，把所有的相关试剂全部配制在一个溶液中，仅由单一溶液组成，简化了操作步骤，并且使检测结果更加稳定可靠。

• 用于免疫组化检测时，如果每个样品的显色液用量为0.1mL，则可以检测1000个样品；
  
• 对于膜的显色检测，如果每次使用2.5mL显色液，则可以检测40次。

• TMB对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
  
• 本制品为无色至微蓝色透明溶液，如果发现TMB辣根过氧化物酶显色液出现混浊或颜色变成较深的蓝色，应该停止使用。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 对于免疫组化检测：
  
  • 参考免疫组化的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5分钟。
    
  • 洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加约100μL TMB显色液。
    
  • 室温避光孵育3～30分钟或更长时间(可在湿盒中显色过夜)，直至显色至预期深浅。
    
  • 去除染色液，加入去离子水或重蒸水孵育10分钟以终止反应。
    
  • 拍照记录或适当封片后拍照记录。如果有必要，可以使用中性红染色液(YT914)进行复染后再进行拍照记录或适当封片后拍照记录。
• 对于膜的HRP显色检测：
  
  • 参考相应的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次5分钟左右。
    
  • 洗涤完毕后，去除洗涤液，
    
  • 滴加约适量TMB显色液充分覆盖膜。
    
  • 室温避光孵育3～30分钟或更长时间(可长达数小时)，直至显色至预期深浅。
    
  • 直接拍照记录。

• 背景显色太深。
  
  • 如果背景显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。另一方面，请选购经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。
    
  • 可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。
• 没有显色或显色太弱。
  
  • 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否可以被正常显色。
    
  • 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
    
  • 可以适当延长显色时间。
    
  • 如果上述改进不能获得预期效果，对于免疫组化或Western，可以考虑更换效果更好的一抗；对于Southern、Northern或原位杂交，则可以考虑更换探针。